3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter MDA2CAM96, 96 tests, 1 ea Käyttö ohjeet

Sivu latautuu ...

102

3

Julkaisuajankohta: 2019-01

Tuoteseloste

Molecular Detection Testipakkaus 2 – Campylobacter

Tuotteen kuvaus ja käyttötarkoitus

3M™ Molecular Detection Testipakkaus 2 – Campylobacter on tarkoitettu käytettäväksi yhdessä 3M™ molekyläärisen

testijärjestelmän kanssa Campylobacter jejuni-, Campylobacter lari- ja Campylobacter coli -bakteerien nopeaan ja

täsmälliseen tunnistamiseen rikastetuista elintarvikenäytteistä ja elintarvikevalmistuksen ympäristönäytteistä.

3M Molecular Detection Testipakkaus perustuu nukleiinihapposekvenssien nopeaan, täsmälliseen ja herkkään

silmukkavälitteiseen isotermiseen monistamismenetelmään (loop-mediated isothermal amplication, LAMP) ja käyttää

monistuksen havaitsemiseen bioluminesenssia. Oletetut positiiviset tulokset ilmoitetaan reaaliaikaisesti, kun taas

negatiiviset tulokset näytetään testin valmistumisen jälkeen. Oletetut positiiviset tulokset on vahvistettava käyttämällä itse

parhaaksi katsottua tai paikallisten määräysten mukaista menetelmää

(1,2)

.

3M Molecular Detection Testipakkaus 2 – Campylobacter on tarkoitettu laboratoriotekniikoihin koulutettujen

ammattilaisten käytettäväksi laboratorioympäristössä. 3M ei ole osoittanut tuotetta käytettäväksi muilla kuin elintarvike-

ja juomateollisuuden aloilla. 3M ei esimerkiksi ole osoittanut tuotetta lääke- tai kosmetiikkanäytteiden testaamiseen eikä

kliinisten tai eläinlääketieteellisten näytteiden testaamiseen. 3M Molecular Detection Testipakkausta 2 – Campylobacter ei

ole arvioitu kaikkien mahdollisten elintarviketuotteiden, elintarvikeprosessien tai testauskäytäntöjen suhteen eikä kaikkien

mahdollisten bakteerikantojen suhteen.

Kuten kaikkien testausmenetelmien tapauksessa, rikastusalustan lähde, koostumus ja laatu voivat vaikuttaa tuloksiin.

Esimerkiksi näytteenottomenetelmät, testausprotokollat, näytteiden valmistelu, käsittely ja laboratoriotekniikka saattavat

myös vaikuttaa tuloksiin. 3M suosittelee menetelmän sekä rikastusalustan arviointia käyttäjän ympäristössä käyttäen

riittävän suurta näytemäärää ja tiettyjä elintarvikenäytteitä ja mikrobisisältöjä sen varmistamiseksi, että menetelmät

vastaavat käyttäjän vaatimuksia.

3M on arvioinut 3M Molecular Detection Testipakkauksen 2 – Campylobacter 3M™CampylobakteeriRikastusliemellä ja

verettömällä Bolton-rikastusliemellä.

3M™ Molekyläärinen testi-instrumentti on tarkoitettu käytettäväksi sellaisten näytteiden kanssa, jotka on lämpökäsitelty

testin lyysivaiheen aikana näytteessä olevien organismien tuhoamiseksi. Jos näytteitä ei ole asianmukaisesti lämpökäsitelty

testin lyysivaiheen aikana, ne saattavat muodostaa biologisen vaaratekijän, jolloin niitä EI saa asettaa 3M Molekylääriseen

testi-instrumenttiin.

3M Food Safety -osaston suunnittelu- ja valmistusmenetelmät on ISO (International Organization for Standardization)

9001 -sertioitu.

3M Molecular Detection Testipakkaus 2 – Campylobacter sisältää 96 testiä, jotka on kuvattu taulukossa 1.

Taulukko 1. 3M Molecular Detection Testipakkauksen osat

Nimike Tunnusmerkki Määrä Sisältö Kommentit

3M™ Lyysiliuos (LS)

Vaaleanpunainen liuos

läpinäkyvissä putkissa

96 (12 kpl 8 putken

liuskoja)

580 μl lyysiliuosta/

putki

Telineessä ja

käyttövalmis

3M™ Molecular

Detection Testipakkaus

2 – Campylobacter

-reagenssiputket

Violetit putket

96 (3 pussia; sisältävät

4 nauhaa, joissa

jokaisessa 8 putkea)

Lyolisoitu spesi

monistus- ja

tunnistusyhdistelmä

Käyttövalmis

Lisäsuojukset Violetit korkit

96 (12 kpl 8 suojuksen

liuskoja)

Käyttövalmis

3M™ Reagenssin valvonta (RC)

Läpinäkyvät ip-top-

putket

16 (2 pussia, joissa

kummassakin

8yksittäistä putkea)

Lyolisoitu kontrolli-

DNA, monistus- ja

tunnistusyhdistelmä

Käyttövalmis

Negatiivisena kontrollina (NC), jota ei toimiteta paketissa, käytetään steriiliä rikastusainetta, kuten

3MCampylobakteeriRikastuslientä. Älä käytä vettä negatiivisena kontrollina.

Pikaopas on saatavilla osoitteesta www.3M.com/foodsafety

(Suomenkielinen)

FI

103

Turvallisuus

Käyttäjän on luettava ja ymmärrettävä kaikki 3M Molekylääristä testijärjestelmää ja 3M Molecular Detection Testipakkausta

2 – Campylobacter koskevat turvallisuusohjeet ja noudatettava niitä. Säilytä turvallisuusohjeet myöhempää käyttöä varten.

VAROITUS: Osoittaa vaarallisen tilanteen, joka saattaa johtaa kuolemaan tai vakavaan loukkaantumiseen ja/tai

omaisuusvahinkoon, jos tilannetta ei vältetä.

HUOMAUTUS: Osoittaa mahdollisesti vaarallisen tilanteen, joka saattaa johtaa aineelliseen vahinkoon, jos tilannetta ei

vältetä.

W VAROITUS

Älä käytä 3M Molecular Detection Testipakkausta 2 – Campylobacter ihmisten tai eläinten diagnosointiin.

Käyttäjän on järjestettävä henkilökunnalleen koulutusta asianmukaisista testausmenetelmistä, joita ovat esimerkiksi:

hyvät laboratoriokäytännöt

(3)

, ISO/IEC 17025

(4)

tai ISO 7218

(5)

.

Väärien negatiivisten tulosten vuoksi markkinoille voi päästä kontaminoituneita tuotteita. Voit vähentää tähän liittyviä

riskejä toimimalla seuraavasti:

• Noudata käytäntöä ja tee testit täsmälleen tuoteselosteessa esitetyllä tavalla.

• Säilytä 3M Molecular Detection Testipakkausta 2 – Campylobacter pakkausmerkintöjen ja tuoteselosteen mukaan.

• Käytä 3M Molecular Detection Testipakkaus 2 – Campylobacter aina ennen viimeistä käyttöpäivää.

• Valmista 3M™Campylobakteeri Rikastusliemi seuraavan tuoteselosteen mukaan

• Älä autoklavoi 3MCampylobakteeriRikastuslientä

• Käytä 3M Molecular Detection Testipakkausta 2 – Campylobacter sellaisiin ympäristönäytteisiin, jotka on validoitu

sisäisesti tai ulkopuolisen tahon toimesta.

• Käytä 3M Molecular Detection Testipakkausta 2 – Campylobacter vain sellaisten pintojen, puhdistusaineiden,

käytäntöjen ja bakteerikantojen kanssa, jotka on hyväksytty sisäisesti tai kolmannen osapuolen toimesta.

• Laimenna ympäristönäytteet, joissa käytetään aryylisulfonaattikompleksia sisältävää neutraloivaa puskuria,

suhteessa 1:2 ennen testausta (1 osa näytettä 1 osaan steriiliä rikastusliuosta). Toinen vaihtoehto on siirtää 10µl

neutraloivaa puskuririkastusliuosta 3M-lyysiliuosputkiin. 3M™-näytteiden käsittelytuotteet, jotka sisältävät

aryylisulfonaattikompleksia sisältävää neutraloivaa puskuria, ovat seuraavat: BPPFV10NB, RS96010NB, RS9604NB,

SSL10NB, SSL10NB2G, HS10NB, HS10NB2G ja HS2410NB2G.

Kemikaaleille ja biologisille vaaratekijöille altistumiseen liittyvien riskien vähentäminen:

• Testaa taudinaiheuttajat asianmukaisesti varustetussa laboratoriossa koulutetun henkilöstön valvonnassa. Inkuboitu

rikastusaine ja laitteet tai pinnat, jotka ovat joutuneet kosketuksiin inkuboidun rikastusaineen kanssa, saattavat sisältää

taudinaiheuttajia määrän, joka riittää aiheuttamaan vaaran ihmisten terveydelle.

• Noudata aina laboratorioiden vakioturvallisuuskäytäntöjä, joihin kuuluu asianmukaisten suojavaatteiden ja

silmäsuojainten käyttäminen reagensseja ja kontaminoituja näytteitä käsiteltäessä.

• Vältä kosketusta rikastusalustan ja reagenssiputkien sisällön kanssa monistuksen jälkeen.

• Hävitä rikastetut näytteet voimassa olevien paikallisten, alueellisten tai kansallisten määräysten mukaisesti.

• Jos näytteitä ei ole asianmukaisesti lämpökäsitelty testin lyysivaiheen aikana, ne saattavat muodostaa biologisen

vaaratekijän, jolloin niitä EI saa asettaa 3M Molekylääriseen testi-instrumenttiin.

Testisetin valmistelun aikana tapahtuvaan ristikontaminaatioon liittyvien riskien vähentäminen:

• Käytä aina suojakäsineitä (käyttäjän suojaamiseksi ja nukleaasien siirtymisen estämiseksi).

Jotta voit vähentää kuumille nesteille altistumisesta aiheutuvia riskejä, noudata seuraavia ohjeita:

• Älä ylitä lämmityslaitteeseen merkittyä suositeltua lämpötila-asetusta.

• Älä ylitä suositeltua kuumennusaikaa.

• Tarkasta 3M™ Molekyläärisen testilämpölohkon pistokkeen lämpötila tarkoituksenmukaisella kalibroidulla

lämpömittarilla (esim. osittain upotettavalla lämpömittarilla tai digitaalisella termoparimittarilla, ei kokonaan

upotettavalla lämpömittarilla). Lämpömittari on asetettava sille määrättyyn paikkaan 3M Molekyläärisen

testilämpölohkon pistokkeessa.

HUOMAUTUS

Testisetin valmistelun aikana tapahtuvaan ristikontaminaatioon liittyvien riskien vähentäminen:

• Vaihda käsineet ennen reagenssipelletin kastelemista.

• Steriilien aerosoliesteen muodostavien molekyylibiologiaan soveltuvaa laatua olevien pipetinkärkien (suodatinkärkien)

käyttö on suositeltavaa.

• Käytä jokaisen näytteen siirtämiseen uutta pipetinkärkeä.

(Suomenkielinen)

FI

104

• Käytä näytteiden siirtämiseen rikastamisesta lyysiputkeen hyviä laboratoriokäytäntöjä. Pipetoijan kontaminoitumisen

välttämiseksi käyttäjä voi halutessaan lisätä ylimääräisen siirtovaiheen. Jokaisen rikastetun näytteen voi esimerkiksi

siirtää steriiliin putkeen.

• Jos mahdollista, käytä molekyylibiologista työasemaa, jossa on bakteerintuholamppu.

• Steriloi laboratorion työtasot ja välineet (pipetit, sulku- ja avaustyökalut jne.) säännöllisesti 1–5-prosenttisella (veteen

laimennetulla) talouskäyttöisellä valkaisuaineliuoksella tai DNA:n poistoliuoksella.

Vähennä vääriin positiivisiin tuloksiin liittyviä riskejä toimimalla seuraavasti:

• Älä koskaan avaa reagenssiputkia monistuksen jälkeen.

• Hävitä kontaminoituneet putket aina liottamalla niitä 1–5-prosenttisessa (veteen laimennetussa) valkaisuaineliuoksessa

1 tunnin ajan etäällä testin valmistelualueelta.

• Älä koskaan autoklavoi reagenssiputkia monistuksen jälkeen.

Katso lisätietoja hävittämisestä ja paikallisista määräyksistä käyttöturvallisuustiedotteesta.

Jos sinulla on jotain tiettyä sovellusta tai menetelmää koskevia kysymyksiä, käy verkkosivuillamme osoitteessa

www.3M.com/foodsafety tai ota yhteyttä paikalliseen 3M-edustajaan tai -jälleenmyyjään.

Käyttäjän vastuu

Käyttäjän vastuulla on tutustua tuoteselosteeseen ja -tietoihin. Lisätietoja saat verkkosivustolla osoitteesta

www.3M.com/foodsafety tai ottamalla yhteyttä paikalliseen 3M-edustajaan tai -jälleenmyyjään.

Testausmenetelmää valitessa on tärkeää ottaa huomioon, että ulkoiset tekijät, kuten näytteenottomenetelmät,

testausprotokollat, näytteiden valmistus, käsittely, laboratoriotekniikat ja itse näyte voivat vaikuttaa testaustuloksiin.

Käyttäjä on aina testausmenetelmää valitessaan vastuussa siitä, että hän arvioi riittävän määrän näytteitä kyseisistä

elintarvikkeista ja mikrobialtistuksista käyttäjän kriteerien täyttymisen varmistamiseksi.

Käyttäjän vastuulla on myös varmistaa, että testausmenetelmät ja tulokset täyttävät hänen asiakkaidensa tai toimittajiensa

vaatimukset.

Kuten kaikkien testausmenetelmien kohdalla, minkä tahansa 3M Food Safety -tuotteen käytöstä saavutetut tulokset eivät

ole takuu matriisien tai testattujen prosessien laadusta.

Voidakseen auttaa erilaisten elintarvikematriisien arvioinnissa 3M on kehittänyt 3M™ Molekyläärisen testitaulukon

valvontapakkauksen. Määritä tarvittaessa 3M Molekyläärisen testitaulukon hallinnan avulla, vaikuttaako matriisi

3MMolecular Detection Testipakkauksen 2 – Campylobakteeri tuloksiin. Testaa validointivaiheiden aikana useita matriisia

edustavia näytteitä, ts. eri lähteistä saatuja näytteitä, kun olet ottamassa käyttöön 3M-menetelmää tai kun olet testaamassa

uusia tai tuntemattomia matriiseja tai matriiseja, joiden raaka-aineita tai valmistustapoja on muutettu.

Matriisi voidaan määrittää tuotetyypiksi, jolla on sisäisiä ominaisuuksia, kuten koostumus ja valmistustapa. Matriisien

väliset erot voivat johtua niinkin yksinkertaisista tekijöistä kuin eroista niiden käsittelyssä tai jalostusasteessa, esim. raaka tai

pastöroitu, tuore tai kuivattu.

Takuun rajoitus / rajoitettu korvausvelvollisuus

3M KIISTÄÄ KAIKKI NIMENOMAISET JA EPÄSUORAT TAKUUT, MUKAAN LUKIEN KAIKKI TAKUUT KÄYPYYDESTÄ

TAI SOPIVUUDESTA TIETTYYN KÄYTTÖTARKOITUKSEEN, PAITSI JOS TUOTEPAKKAUKSEN TAKUUOSIOSSA TOISIN

MAINITAAN. Jos mikä tahansa 3M Food Safety -tuote on viallinen, 3M tai sen valtuutettu jälleenmyyjä joko korvaa

tuotteen tai palauttaa sen ostohinnan. Nämä ovat ainoat myönnetyt korvaukset. Käyttäjän on ilmoitettava 3M:lle viipymättä

kuudenkymmenen päivän sisällä kaikista epäillyistä tuotevirheistä ja palautettava tuote 3M:lle. Pyydä palautusohjeet

ottamalla yhteyttä asiakaspalveluun (1-800-328-1671, Yhdysvallat) tai viralliseen 3M Food Safety -edustajaasi.

3M:N vastuun rajoitukset

3M EI OLE VASTUUSSA MENETYKSISTÄ TAI VAHINGOISTA, OLIVAT NE SITTEN SUORIA, EPÄSUORIA,

ERITYISLAATUISIA, SATUNNAISIA TAI VÄLILLISIÄ, MUKAAN LUKIEN VOITONMENETYKSET. Missään tapauksessa

3M:n vastuu ei minkään laillisen perusteen mukaan ole suurempi kuin vialliseksi väitetyn tuotteen hinta.

Säilytys ja hävittäminen

Säilytä 3M Molecular Detection Testipakkaus 2 – Campylobacter 2–8°C:n (35–47°F) lämpötilassa. Suojattava

jäätymiseltä. Säilytä paketti valolta suojattuna. Kun olet avannut paketin, tarkista, että foliopussi on ehjä. Ei saa käyttää, jos

pussi on vahingoittunut. Avaamisen jälkeen käyttämättömät reagenssiputket on aina säilytettävä uudelleensuljettavassa

pussissa, jonka sisällä on kuivausainetta lyolisoitujen reagenssien stabiliteetin ylläpitämiseksi. Säilytä uudelleensuljettuja

pusseja 2–8°C:n (35–47°F) lämpötilassa enintään 90 päivän ajan.

Älä käytä 3M Molecular Detection Testipakkausta 2 – Campylobacter viimeisen käyttöpäivän jälkeen. Viimeinen

käyttöpäiväys ja eränumero on merkitty pakkauksen ulkopuolelle. Käytön jälkeen rikastusaine ja 3M Molecular Detection

(Suomenkielinen)

FI

105

Testipakkauksen 2 – Campylobacter putket voivat sisältää mahdollisesti patogeenisia aineita. Kun testi on suoritettu

loppuun, noudata saastuneen jätteen hävittämisessä alan nykykäytäntöjä. Katso lisätietoja hävittämisestä ja paikallisista

määräyksistä käyttöturvallisuustiedotteesta.

Käyttöohjeet

Noudata huolellisesti kaikkia ohjeita. Jos ohjeita ei noudateta, tulokset saattavat olla epätarkkoja.

Steriloi laboratorion työtasot ja välineet (pipetit, sulku- ja avaustyökalut jne.) säännöllisesti 1–5-prosenttisella (veteen

laimennetulla) talouskäyttöisellä valkaisuaineliuoksella tai DNA:n poistoliuoksella.

Käyttäjän on suoritettava 3M Molekyläärisen testijärjestelmän käyttäjäkoulutus, kuten asiakirjassa ”Installation

Qualication (IQ) / Operational Qualication (OQ) Protocols and Instructions for 3M Molecular Detection System”

(6)

kuvataan.

Aineen valmistus

Valmista 3MCampylobakteeri Rikastusliemi (CE250) seuraavan tuoteselosteen mukaan. Älä autoklavoi ainetta ennen

käyttöä. Käytä valmistettu aine vähintään 24 tunnin kuluessa valmistuksesta. Säilytä valmistettua lientä 2–8°C:ssa

(7)

ja suojattuna valolta, jos sitä ei käytetä heti valmistamisen jälkeen. Varmista, että aine on lämmennyt 20–30°C:seen

ennenkäyttöä.

Näytteen ottaminen

3MCampylobakteeriRikastuslientä ei tule käyttää lintujen huuhteluun tai kuljetusaineena. Kerää ja kuljeta näytteet

vakiintuneiden näytteenkeräystoimenpiteidesi mukaisesti.

Näytteiden rikastus

Taulukossa 2 on yleisten rikastuskäytäntöjen ohjeet elintarvike- ja ympäristönäytteille.

Käyttäjän vastuulla on vahvistaa vaihtoehtoisten näytteenottokäytäntöjen ja laimennussuhteiden soveltuvuus sen

varmistamiseksi, että testimenetelmä vastaa käyttäjän kriteereitä.

Näytteen valmistus

a. Ruhojen huuhtelut ja raakojen siipikarjaosien huuhtelut

1. Huuhtele yksi raaka siipikarjan ruho, josta sisäelimet on poistettu, 400 ml:lla puskuroitua peptonivettä (BPW)

yhden minuutin ajan. Jos huuhtelet raakoja siipikarjanosia, huuhtele 1,8–2 kg (4 lb±10%) linnun osia 400 ml:lla

BPW:tä

(1,8)

.

2. Ruhojen ja raakojen siipikarjaosien tapauksessa salli ylimääräisen nesteen tippua ennen näytteen huuhtelua, jotta

ylimääräinen käsittelyneste ei siirry näytepussiin

(8)

.

3. Jos siipikarja on käsitelty setyylipyridiniumkloridilla (CPC), on näytteeseen lisättävä 5 ml polysorbaatti

80:a per l (IUPAC: Sorbitaanimono-oleaatti, etoksiloitu (20); CAS 9005-65-6) valmistettua

3MCampylobakteeriRikastuslientä. Polysorbaatti 80 voidaan lisätä veteen ennen sterilointia helpottamaan

liukenemista tai se voidaan lisätä suoraan steriiliin veteen ennen 3MCampylobakteeriRikastusliemen

valmistamista.

4. Siirrä aseptisesti 30 ml huuhtelunestettä steriiliin pussiin ja lisää 30 ml 3MCampylobakteeriRikastuslientä.

b. Ruhosieni

1. Sienet tulisi kosteuttaa ennen näytteen ottamista korkeintaan 25 ml:lla BPW:tä

(1)

. Jos näytteitä kuljetetaan,

varmista, että pussit on rullattu alas ja että ne säilytetään 2–8°C:ssa.

2. Ota näyte siipikarjan ruhosta tai kerää näyte sienellä.

3. Aseta näyte steriiliin pussiin ja lisää 25 ml 3MCampylobakteeriRikastuslientä. Varmista, että tossu tai sieni on

päällystetty rikastusliemellä.

c. Raa’at siipikarjatuotteet

1. Punnitse aseptisesti 325 ±32,5g näytettä ja aseta se steriiliin pussiin. Lisää 1625 ±32,5ml BPW:tä raakaan

siipikarjatuotteeseen. Hajauta rykelmät sekoittamalla huolellisesti käsin puristelemalla.

2. Lisää sekoittamisen jälkeen 30ml raa’an siipikarjatuotteen seosta steriiliin pussiin ja lisää sen jälkeen

30ml3MCampylobakteeriRikastuslientä ja sekoita huolellisesti.

d. Raaka ja syöntivalmis liha

1. Punnitse aseptisesti 25 g näytettä ja aseta se steriiliin pussiin. Suodatinpussia suositellaan näytteenoton

helpottamiseksi.

2. Lisää 225 ml 3M CampylobakteeriRikastuslientä.

(Suomenkielinen)

FI

106

3. Puristele käsin rykelmät rikki ja vältä kuplien syntyminen sekoittamisen aikana. Älä käsittele pussia vatsakäsittelyllä

tai tehosekoittimilla.

e. Ensisijaisen tuotannot tossunäytteet

1. Kerää näyte tossuilla tai sukilla noudattaen vakiintuneita näytteenottoprosesseja.

2. Aseta YKSI sukka steriiliin pussiin ja lisää 100 ml 3MCampylobakteeriRikastuslientä.

f. Pyyhkäisynäyte

1. Kerää näyte esikostetulla näytteenottolaitteella noudattaen vakiintuneita näytteenottoprosesseja.

2. Aseta näyte steriiliin pussiin ja lisää 100 ml 3MCampylobakteeriRikastuslientä.

Rikastuksen inkubaatio

1. Rullaa pussia kiinni minimoidaksesi ylimääräisen tilan ja välttääksesi rikastuksen altistumisen ilmalle. Puristele pussia

hellävaroen noin 10±2 sekunnin ajan. Älä käsittele pussia vatsakäsittelyllä tai tehosekoittimilla ja vältä kuplien

muodostamista sekoittamisen aikana.

2. Inkuboi pussia aerobisesti 41,5±1°C:ssa, katso taulukosta 2 sopivat inkubaatioajat.

VAROITUS: Mikäli päätät käyttää sienen hydratointiliuoksena aryylisulfonaattikompleksia sisältävää neutraalia puskuria,

rikastettu ympäristönäyte on laimennettava suhteessa 1:2 (1osa näytettä 1osaan steriiliä rikastusliuosta) ennen testausta

sellaisten väärien negatiivisten tulosten riskien vähentämiseksi, joiden vuoksi markkinoille voi päästä kontaminoituneita

tuotteita. Toinen vaihtoehto on siirtää 10µl neutraloivaa puskuririkastusliuosta 3M-lyysiliuosputkiin.

Käyttäjän vastuulla on vahvistaa vaihtoehtoisten näytteenottokäytäntöjen ja laimennussuhteiden soveltuvuus sen

varmistamiseksi, että testimenetelmä vastaa käyttäjän kriteereitä.

Taulukko 2. Yleiset rikastuskäytännöt.

Näytematriisi Näytteen koko 3M Campylobakteeri

Rikastusliemi (ml)

(b)

Rikastuslämpötila

(±1°C)

Rikastusaika

(h)

Näytteen

analyysitilavuus

(μl)

(c)

• Ruhohuuhtelut

(a)

• Lintujen osien

huuhtelut

(a)

30 ml

puhdistukseen

käytettyä vettä

BPW:ssä

30 41,5 22–26 20

• Ruhosieni

(a)

1 sieni, joka on

esikosteutettu

korkeintaan

25ml:lla

BPW:tä

25 41,5 22–26 20

• Raaka liha

• Syöntivalmis liha

25 g 225 41,5 24–28 20

• Tossunäytteet

ensisijaisesta

tuotannosta

1 tossunäyte 100 41,5 22–26 20

• Pyyhkäisynäyte

ensisijaisesta

tuotannosta

1 esikosteutettu

laite

100 41,5 22–26 20

(a) Jos linnut on käsitelty setyylipyridiniumkloridilla (CPC), on näytteeseen lisättävä 5 ml polysorbaatti

80:a per l (IUPAC: Sorbitaanimono-oleaatti, etoksiloitu (20); CAS 9005-65-6) valmistettua

3MCampylobakteeriRikastuslientä. Polysorbaatti 80 voidaan lisätä veteen ennen sterilointia tai se voidaan lisätä

steriiliin veteen ennen 3MCampylobakteeriRikastusliemen valmistamista.

(b) 3MCampylobakteeriRikastusliemi tulee käyttää 24 tunnin kuluessa valmistuksesta. Aineen tulisi olla

huoneenlämpöistä (25–30°C) ennen käyttöä.

(c) Ennen kuin keräät rikastusnäytteen analyysia varten, puristele pussin pohjaa hellävaroen. Kun olet ottanut näytteen,

rullaa pussia kiinni välttääksesi rikastuksen altistumisen ilmalle. Lisänäytettä saatetaan vaatia uusintatestausta tai

vahvistusvaiheita varten.

Erikoisohjeet validoituja menetelmiä varten

(Suomenkielinen)

FI

107

AOAC® Performance Tested

SM

(PTM) -sertikaatti nro 111803

Tutkimuslaitos AOAC:n PTM

SM

-ohjelmissa 3M Molekulaarinen Testipakkaus 2 – Campylobacter todettiin tehokkaaksi

Campylobakteerin havaitsemismenetelmäksi. Tutkimuksessa testatut matriisit näkyvät taulukossa 3.

Taulukko 3. AOAC PTM

SM

-sertikaatin nro 111803 mukaiset rikastuskäytännöt.

Näytematriisi Näytteen koko 3M Campylobakteeri

Rikastusliemi (ml)

(c)

Rikastuslämpötila

(±1°C)

Rikastusaika (h) Näytteen

analyysitilavuus

(μl)

(d)

Koko ruho

huuhdellaan

400ml:lla BPW:tä

(a) (b)

30 ml

puhdistukseen

käytettyä vettä

BPW:ssä

30 41,5 22–26 20

Linnun osa

(1,8–2kg)

huuhdellaan

400ml:lla BPW:tä

(a) (b)

30 ml

puhdistukseen

käytettyä vettä

BPW:ssä

30 41,5 22–26 20

Kalkkunan

ruhosieni

(a) (b)

1 sieni, joka on

esikosteutettu

korkeintaan

25ml:lla

BPW:tä

25 41,5 24-26 20

Raaka siipikarjan

jauheliha

(325±32,5 g)

huuhdellaan

1625±32,5 ml:lla

BPW:tä

(b)

30 ml tuote-

seosta BPW:ssä

30 41,5 24–28 20

Kananuggetit 25 g 225 41,5 24–28 20

(a) Jos linnut on käsitelty setyylipyridiniumkloridilla (CPC), on näytteeseen lisättävä 5 ml polysorbaatti

80:a per l (IUPAC: Sorbitaanimono-oleaatti, etoksiloitu (20); CAS 9005-65-6) valmistettua

3MCampylobakteeriRikastuslientä. Polysorbaatti 80 voidaan lisätä veteen ennen sterilointia tai se voidaan lisätä

steriiliin veteen ennen 3MCampylobakteeriRikastusliemen valmistamista.

(b) Vaihtoehtoisesti tämä matriisi voidaan rikastaa 30 ml:lla 2X veretöntä Bolton-rikastuslientä (BF-BEB) 48±2 h:n ajan

42±1,0°C:ssa mikroaerobisissa olosuhteissa. Siirrä 20 µl näytettä 3M Lyysiliuosputkeen.

(c) 3MCampylobakteeriRikastusliemi tulee käyttää 24 tunnin kuluessa valmistuksesta. Aineen tulisi olla

huoneenlämpöistä (25–30°C) ennen käyttöä.

(d) Ennen kuin keräät rikastusnäytteen analyysia varten, puristele pussin pohjaa hellävaroen. Kun olet ottanut näytteen,

rullaa pussia kiinni välttääksesi rikastuksen altistumisen ilmalle. Lisänäytettä saatetaan vaatia uusintatestausta tai

vahvistusvaiheita varten.

3M™ Molekyläärisen testinopeuden latausalustan valmistelu

1. Kostuta liina tai kertakäyttöinen liina 1–5-tilavuusprosenttisella (veteen laimennetulla) talouskäyttöisellä

valkaisuliuoksella ja pyyhi 3M Molekyläärisen testinopeuden latausalusta.

2. Huuhtele 3M Molekyläärisen testinopeuden latausalusta vedellä.

3. Pyyhi 3M Molekyläärisen testinopeuden latausalusta kuivaksi kertakäyttöisellä liinalla.

4. Varmista ennen käyttöä, että 3M Molekyläärisen testinopeuden latausalusta on kuiva.

3M™ Molekyläärisen testijäähdytyslohkon pistokkeen valmistelu

Aseta 3M Molekyläärisen testijäähdytyslohkon pistoke suoraan laboratorion työtasolle: 3M Molekyläärisen

testijäähdytyslohkon alustaa ei käytetä. Käytä lohkoa laboratorion tavallisessa lämpötilassa (20–25°C).

(Suomenkielinen)

FI

108

3M™ Molekyläärisen testilämpölohkon pistokkeen valmistelu

Aseta 3M Molekyläärisen testilämpölohkon pistoke kaksilohkoiseen kuivalämmityslaitteeseen. Kytke kuivalohkolämmitin

päälle, aseta lämpötila ja anna 3M Molekyläärisen testilämpölohkon pistokkeen lämmetä 100±1°C:n lämpötilaan niin, että

saavutettu lämpötila pysyy samana.

HUOMAUTUS: Anna 3M Molekyläärisen testilämpölohkon pistokkeen lämmetä asetuslämpötilaan noin 30 minuuttia

lämmityslaitteen mukaan. Varmista tarkoituksenmukaisen kalibroidun lämpömittarin avulla (esim. osittain upotettava

lämpömittari tai digitaalinen termoparimittari, ei kokonaan upotettava lämpömittari), joka on asetettu sille määrättyyn

paikkaan, että 3M Molekyläärisen testilämpölohkon pistokkeen lämpötila on 100±1°C.

3M™ Molekyläärisen testi-instrumentin valmistelu

1. Käynnistä 3M™ Molekyläärisen testijärjestelmän ohjelmisto ja kirjaudu sisään. Varmista 3M Food Safety -edustajaltasi,

että käytössäsi on ohjelmiston uusin versio.

2. Kytke 3M Molekyläärinen testi-instrumentti päälle.

3. Luo tai muokkaa ajo kunkin näytteen tiedoille. Katso tarkemmat tiedot 3M Molekyläärisen testijärjestelmän

käyttöoppaasta.

HUOMAUTUS: 3M Molekyläärisen testi-instrumentin on saavutettava Valmis-tila ennen 3M Molekyläärisen

testinopeuden latausalustan ja reaktioputkien asettamista laitteeseen. Lämmitysvaihe kestää noin 20 minuuttia, ja sen

merkiksi instrumentin tilarivillä palaa ORANSSI valo. Kun instrumentti on valmis ajon käynnistämistä varten, tilarivin valo

muuttuu VIHREÄKSI.

Lyysi

Poista 3M Lyysiliuostelineen pohja ruuvimeisselillä ennen kuin asetat sen 3M Molekyläärisen testilämpölohkon

pistokkeeseen.

1. Anna 3M Lyysiliuosputkien lämmetä jättämällä teline huoneenlämpöön (20–25°C) yön yli (16–18 tunnin ajaksi).

3MLyysiliuosputket voi lämmittää huoneenlämpöön myös asettamalla ne laboratorion työtasolle vähintään 2 tunniksi,

inkuboimalla 3M Lyysiliuosputkia inkubaattorissa 37±1°C:ssa 1tunnin ajan tai asettamalla 3MLyysiliuosputket

kaksilohkoiseen kuivalämmittimeen 100°C:n lämpötilaan 30sekunniksi.

2. Sekoita suljetut putket kääntämällä ne ylösalaisin. Siirry seuraavaan vaiheeseen 4 tunnin kuluessa kääntämisestä.

3. Poista rikastettu näyte inkubaattorista.

3.1.1 Puristele rikastuspussin pohjaa hellävaroen ennen kuin siirrät näytteen 3M Lyysiliuosputkeen.

3.1.2 Lisänäytettä saatetaan vaatia uusintatestausta tai vahvistusvaiheita varten. Kun olet ottanut näytteen, rullaa

pussia kiinni minimoidaksesi ylimääräisen tilan ja välttääksesi rikastuksen altistumisen ilmalle. Jos oletettujen

tulosten vahvistusta vaaditaan, suorita vahvistusvaiheet heti, kun oletetut tulokset on saatu.

4. Jokaiselle näytteelle ja negatiiviselle kontrollinäytteelle (steriili rikastusaine) tarvitaan yksi 3M Lyysiliuosputki.

4.1 3M Lyysiliuos-putkiliuskat voidaan leikata haluttuun putkimäärään. Valitse tarvittava määrä putkia tai 8 putken

nauhoja. Aseta 3MLyysiliuosputket tyhjään telineeseen.

4.2 Ristikontaminaation välttämiseksi poista suojus yhdestä 3M Lyysiliuosputkiliuskasta kerrallaan ja käytä jokaiseen

siirtovaiheeseen uutta pipettiä.

4.3 Siirrä rikastettu näyte 3MLyysiliuosputkiin seuraavien ohjeiden mukaisesti:

Siirrä jokainen rikastettu näyte ensin erilliseen 3MLyysiliuosputkeen. Siirrä negatiivinen kontrolli (NC)

viimeiseksi.

4.4 Käytä 3M™ Molekyläärisen testin cap/decap-työkalua – Lysis yhden 3MLyysiliuosputkiliuskan avaamiseen. Avaa

yksi liuska kerrallaan.

4.5 Heitä 3MLyysiliuosputken suojus pois - jos lysaatti säilytetään uudelleentestausta varten, laita suojukset

puhtaaseen astiaan lyysin jälkeistä uudelleenkäyttöä varten.

4.5.1 Säilytetyn lysaatin käsittelyyn liittyvät ohjeet ovat liitteessä A.

4.6 Siirrä 20 µl näytettä 3M Lyysiliuosputkeen.

(Suomenkielinen)

FI

109

5. Toista tarvittaessa vaiheet 4.4–4.6 testattavien näytteiden määrän mukaan.

20 µl

6. Kun kaikki näytteet on siirretty, siirrä 20µl negatiivista kontrollia (steriiliä rikastusainetta, esim. puskuroitua

peptonivettä, BPW) 3MLyysiliuosputkeen. Älä käytä vettä negatiivisena kontrollina.

7. Varmista, että 3M Molekyläärisen testilämpölohkon pistokkeen lämpötila on 100±1°C.

8. Aseta peittämätön 3MLyysiliuosputkiteline 3M Molekyläärisen testilämpölohkon pistokkeeseen ja kuumenna

15±1minuuttia. Kuumennuksen aikana 3M Lyysiliuoksen väri muuttuu vaaleanpunaisesta (viileä) keltaiseksi (kuuma).

8.1 Jos näytteitä ei ole asianmukaisesti lämpökäsitelty testin lyysivaiheen aikana, ne saattavat muodostaa biologisen

vaaratekijän, jolloin niitä EI saa asettaa 3M Molekylääriseen testi-instrumenttiin.

9. Poista peittämätön 3MLyysiliuosputkiteline 3M Molekyläärisestä lämmityslohkosta ja anna sen viilentyä

3MMolekyläärisessä testijäähdytyslohkon pistokkeessa vähintään 5 minuuttia ja enintään 10 minuuttia.

3MMolekyläärisen testijäähdytyslohkon pistoke, jota käytetään ympäristön lämpöisenä ilman 3M™ Molekyläärisen

testijäähdytyslohkon alustaa, asetetaan suoraan laboratorion työtasolle. Viileänä 3M-lyysiliuoksen väri

palaavaaleanpunaiseksi.

10. Poista 3MLyysiliuosputkiteline 3MMolekyläärisen testijäähdytyslohkon pistokkeesta.

00:15:00

99-101ºC

20-25ºC

00:05:00

Monistaminen

1. Jokaiselle näytteelle ja negatiiviselle kontrollinäytteelle tarvitaan yksi 3M Molecular Detection Testipakkaus

2 – Campylobacter -reagenssiputki.

1.1 Putkiliuskat voidaan leikata haluttuun määrään putkia. Valitse tarvittava yksittäisten 3MMolecular Detection

Testipakkausten 2 – Campylobacter -reagenssiputkien tai 8putken liuskojen määrä.

1.2 Aseta putket tyhjään telineeseen.

1.3 Vältä liikuttamasta reagenssipellettejä putkien pohjalta.

2. Valitse yksi 3MReagenssin valvontaputki ja aseta telineeseen.

3. Ristikontaminaation välttämiseksi poista suojus yhdestä 3M Molecular Detection Testipakkaus 2 – Campylobacter

-reagenssiputkinauhasta kerrallaan ja käytä uutta pipetin kärkeä jokaisessa siirtovaiheessa.

4. Siirrä jokainen lysaatti 3MMolecular Detection Testipakkauksen 2 – Campylobacter -reagenssiputkeen ja

3MReagenssin valvontaputkeen seuraavasti:

Siirrä jokainen näytelysaatti yksittäiseen 3M Molecular Detection Testipakkaus 2 – Campylobacter -reagenssiputkeen

ensin ja sitten negatiivinen kontrolli. Hydratoi 3MReagenssin valvontaputki viimeisenä.

5. Avaa 3M Molecular Detection Testipakkauksen 2 Campylobacter -reagenssiputki käyttämällä 3M™ Molekyläärisen

testin cap/decap-työkalua - Reagenssi. Avaa yksi putkiliuska kerrallaan. Heitä suojus pois.

5.1 Siirrä 20µl näytelysaattia 3MLyysiliuosputkessa olevan nesteen ylemmästä puoliskosta (vältä sakkaa)

vastaavaan 3MMolecular Detection Testipakkauksen 2 –

Campylobacter

-reagenssiputkeen. Annostele

vinossa kulmassa, jotta et liikuta pellettejä. Sekoita pipetoimalla varovasti ylös ja alas 5 kertaa.

5.2 Toista vaihe 5.1, kunnes kaikki yksittäiset näytelysaatit on lisätty vastaavaan 3MMolekulaarisen testipakkauksen

2– Campylobacter -reagenssiputkeen liuskassa.

5.3 Peitä 3MMolekyläärisen testipakkauksen 2 – Campylobacter -reagenssiputket mukana toimitetuilla lisäsuojuksilla

ja varmista, että ne ovat tiukasti paikoillaan painamalla niitä 3M Molekyläärisen testin cap/decap-työkalun -

Reagenssi pyöristetyllä puolella eteen- ja taaksepäin suuntautuvalla liikkeellä.

5.4 Toista tarvittaessa vaiheet 5.1–5.3 testattavien näytteiden määrän mukaan.

(Suomenkielinen)

FI

110

5.5 Kun kaikki näytelysaatit on siirretty, siirrä 20µl negatiivista kontrollilysaattia 3MMolecular Detection

Testipakkauksen 2 – Campylobacter -reagenssiputkeen toistamalla vaiheet 5.1–5.3.

5.6 Siirrä 20µl negatiivista kontrollilysaattia 3MReagenssin valvontaputkeen. Annostele vinossa kulmassa, jotta et

liikuta pellettejä. Sekoita pipetoimalla varovasti ylös ja alas 5 kertaa.

6. Aseta suojuksella suljetut putket puhtaaseen ja steriloituun 3M Molekyläärisen testinopeuden latausalustaan. Sulje ja

lukitse 3M Molekyläärisen testinopeuden latausalustan kansi.

20 µL

7. Tarkasta ja vahvista määritetty ajo 3M Molekyläärisen testijärjestelmän ohjelmistossa.

8. Napsauta ohjelmiston Start (Käynnistä) -painiketta ja valitse käytettävä instrumentti. Valitun instrumentin kansi aukeaa

automaattisesti.

9. Aseta 3M Molekyläärisen testinopeuden latausalusta 3M Molekylääriseen testi-instrumenttiin ja aloita testi sulkemalla

kansi. Saat tulokset 60 minuutin kuluessa, positiiviset tulokset saatetaan kuitenkin havaita jo aikaisemmin.

10. Kun testi on suoritettu loppuun, ota 3M Molekyläärisen testinopeuden latausalusta 3M Molekyläärisestä testi-

instrumentista ja hävitä putket liottamalla niitä 1–5-prosenttisessa (veteen laimennetussa) talouskäyttöisessä

valkaisuaineliuoksessa 1tunnin ajan ja etäällä testin valmistelualueelta.

HUOMAUTUS: Jotta ristikontaminaation aiheuttamien väärien positiivisten riski olisi mahdollisimman pieni, älä

koskaan avaa monistettua DNA:ta sisältäviä reagenssiputkia. Tämä koskee 3MMolecular Detection Testipakkauksen

2 – Campylobacter -reagenssiputkia, 3M Reagenssin valvontaputkia ja 3M Testitaulukon valvontaputkia. Hävitä

tiiviisti suljetut reagenssiputket aina liottamalla niitä 1–5-tilavuusprosenttisella (veteen laimennetulla) talouskäyttöisellä

valkaisuliuoksella 1 tunnin ajan ja etäällä testin valmistelualueelta.

Tulokset ja tulkinta

Algoritmi tulkitsee nukleiinihappojen monistuksen tunnistuksesta saatavaa valon sirontakäyrää. Ohjelmisto analysoi tulokset

automaattisesti, ja tulokset värikoodataan tuloksen mukaan. Positiivinen tai negatiivinen tulos määritetään analysoimalla

useita yksilöllisiä käyräparametreja. Oletetut positiiviset tulokset ilmoitetaan reaaliaikaisesti, kun taas negatiiviset ja

tarkastettavat tulokset näytetään ajon valmistumisen jälkeen.

Oletetut positiiviset näytteet on vahvistettava laboratorion vakiotoimintamenetelmien mukaisesti tai noudattamalla

asianmukaista vertailumenetelmää

(1,2)

aloittamalla näytteen siirrosta ensisijaisesta 3MCampylobakteeriRikastusliemestä

valikoiviin Campylobakteeri-levyihin, joissa on mikroaeroilinen inkubaatio, minkä jälkeen vahvistetaan isolaatit käyttämällä

asianmukaisia biokemiallisia mikroskooppisia ja serologisia menetelmiä. Parhaat säilytystulokset rikasteelle saadaan, kun

rikastuspussia rullataan alas näytteen ottamisen jälkeen.

HUOMAUTUS: Negatiivinenkaan näyte ei anna nollalukemaa, sillä järjestelmällä ja 3M Molecular Detection

Testipakkauksen 2 – Campylobacter monistusreagensseilla on tausta-RLU-lukema (suhteellinen valoyksikkö).

Joissain harvoissa tapauksissa valon sironta voi olla epätavallinen, jolloin algoritmi merkitsee sen tarkastettavaksi.

3Msuosittelee testin uusimista tarkastettavaksi merkittyjen näytteiden osalta. Jos tulokseksi tulee jatkuvasti Inspect, tee

varmistustesti käyttämällä itse parhaaksi katsomaasi menetelmää tai paikallisten määräysten mukaista menetelmää

(1,2)

.

Liite A. Käytännön keskeytys: Lämpökäsiteltyjen lysaattien säilyttäminen ja uudelleentestaus

1. Säilytä lämpökäsitelty lysaatti sulkemalla 3M Lyysiliuosputki uudelleen puhtaalla suojuksella (katso Lyysi-osio, 4.5)

2. Säilytä 2–8°C:ssa enintään 72 tuntia.

3. Valmistele säilytetty näyte monistamista varten kääntelemällä sitä 2–3 kertaa, jotta se sekoittuu.

4. Poista suojukset putkista.

5. Aseta sekoitetut lyysiputket 3MMolekyläärisen testilämpölohkon pistokkeeseen ja kuumenna 100±1°C:ssa

5±1minuuttia.

6. Poista 3MLyysiliuosputkiteline 3M Molekyläärisestä lämmityslohkosta ja anna sen viilentyä 3M Molekyläärisessä

testijäähdytyslohkon pistokkeessa vähintään 5 minuuttia ja enintään 10 minuuttia.

7. Jatka edellä olevasta kohdasta Monistaminen.

(Suomenkielinen)

FI

Sivu latautuu ...

3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter MDA2CAM96, 96 tests, 1 ea Käyttö ohjeet

3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter MDA2CAM96, 96 tests, 1 ea Käyttö ohjeet

muilla kielillä

Liittyvät paperit

Muut asiakirjat